技術(shù)支持Article
CBA流式多因子的工作原理介紹
點(diǎn)擊次數(shù)：1213 更新時(shí)間：2022-09-27
CBA，即微量樣本多指標(biāo)流式蛋白定量技術(shù)是一個(gè)基于流式細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)的多重蛋白定量檢測(cè)方法，它能夠同時(shí)對(duì)單個(gè)樣品中的多個(gè)指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)。
通過(guò)利用一系列帶有熒光標(biāo)記的微小、分散的微球連接特定的捕獲抗體以捕捉溶液系統(tǒng)中的待測(cè)物，通過(guò)對(duì)應(yīng)各種不同檢測(cè)物的特異微球上所帶有熒光強(qiáng)度不同從而同時(shí)測(cè)定分析樣本中多種可溶性成分的數(shù)量。
CBA流式多因子包被細(xì)胞因子特異性抗體的熒光磁性微球與待測(cè)樣本孵育，可與樣本中相應(yīng)的細(xì)胞因子特異性結(jié)合，加入生物素標(biāo)記的檢測(cè)抗體后，形成抗體包被微球-細(xì)胞因子-檢測(cè)抗體的免疫復(fù)合物；最后加入SAV-PE，通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)，熒光強(qiáng)度與樣本中細(xì)胞因子的含量成正比，最后結(jié)合細(xì)胞因子標(biāo)準(zhǔn)品的標(biāo)準(zhǔn)曲線，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)同一份樣本中細(xì)胞因子的定量檢測(cè)。
細(xì)胞因子在體內(nèi)具有重要的病理作用，在感染、炎癥、自身免疫病、免疫缺陷疾病等狀態(tài)下，部分細(xì)胞因子會(huì)明顯變化，根據(jù)這些指標(biāo)可以判斷機(jī)體的免疫功能。血清、血漿或組織液中細(xì)胞因子檢測(cè)可以對(duì)疾病診斷和治療做出相應(yīng)評(píng)價(jià),具有重要的應(yīng)用價(jià)值。廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)以及腫瘤學(xué)等領(lǐng)域的流式細(xì)胞術(shù)是細(xì)胞因子檢測(cè)的一種方法。
由于血清、細(xì)胞培養(yǎng)上清、積液中的細(xì)胞因子含量低，不容易檢測(cè)，加上樣本數(shù)量少，傳統(tǒng)的方法無(wú)法滿足多因子檢測(cè)。流式微球捕獲芯片技術(shù)（CBA）微量樣本多重蛋白定量技術(shù)，是用流式細(xì)胞儀對(duì)多重蛋白進(jìn)行定量檢測(cè)的方法，能夠同時(shí)對(duì)樣本中的多個(gè)指標(biāo)進(jìn)行定性、定量檢測(cè)，可用于細(xì)胞因子檢測(cè)。
流式細(xì)胞儀技術(shù)（FCM）技術(shù)可以應(yīng)用流式細(xì)胞儀，結(jié)合單克隆抗體技術(shù)、免疫熒光染色技術(shù)，對(duì)快速流動(dòng)液體中的單細(xì)胞進(jìn)行多種參數(shù)測(cè)量和分析。CBA檢測(cè)系統(tǒng)采用聚苯乙烯熒光微球連結(jié)特定的捕獲抗體，捕捉待測(cè)物，同時(shí)再加入待測(cè)物的熒光抗體，三者形成夾心復(fù)合物，通過(guò)流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè)。流式細(xì)胞術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是同時(shí)可以進(jìn)行多參數(shù)檢測(cè)，快速并且信息量大。
