更新時間: | 2018-06-20 |
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廠商性質(zhì): | 生產(chǎn)廠家 |
胰蛋白酶(Trypsin)是由胰臟產(chǎn)生沒有活性的胰蛋白酶原分泌到小腸后,小腸內(nèi)的腸肽酶會活化該酶原,形成胰蛋白酶。
胰蛋白酶-EDTA 溶液(0.05%:0.02%,含酚紅)
產(chǎn)品簡介:
胰蛋白酶(Trypsin)是由胰臟產(chǎn)生沒有活性的胰蛋白酶原分泌到小腸后,小腸內(nèi)的腸肽酶會活化該酶原,形成胰蛋白酶。胰蛋白酶的特點在于已經(jīng)活化的胰蛋白酶,能夠繼續(xù)活化
更多胰蛋白酶原,這種過程即自動催化。胰蛋白酶在小腸工作,它會將蛋白質(zhì)水解為肽,進而分解為氨基酸,其適溫度約為 37℃。
研謹生物Trypsin-EDTA solution(0.05%:0.02%,含酚紅)由 0.05%胰酶、0.02%EDTA、
少量酚紅等組成,經(jīng)過濾除菌。本試劑可以直接用于培養(yǎng)細胞的消化,或者一些組織的消化,通常室溫下 1~2min 左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細胞。
產(chǎn)品組成:
Trypsin-EDTA solution(0.05%:0.02%,含酚紅) 100ml -20℃
自備材料:
1、 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液
2、 顯微鏡
3、 離心機
操作步驟(僅供參考):
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min,
不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的*細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落,直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量
去除胰酶細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化
不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
注意事項:
1、 盡量減少反復凍融的次數(shù),以免失效。
2、在使用 Trypsin-EDTA solution 過程中,要特別注意避免消化液被細菌污染。3、Trypsin-EDTA solution 消化細胞時間不宜過長,否則細胞鋪板后生長狀況會較差。
4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期: 12 個月有效。